醫(yī)療器械創(chuàng)新網(wǎng)
尋找藍(lán)海—腦脊液特異性抗體檢測
神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病十分常見，是一組由細(xì)菌、真菌、病毒和螺旋體等多種病原體侵犯腦實(shí)質(zhì)和血管等引起的急、慢性炎癥性或非炎癥性疾病，根據(jù)感染的部位不同可分單個(gè)部位感染和多部位感染（見圖1）。神經(jīng)系統(tǒng)急性感染是臨床醫(yī)療中最重視的問題之一，尤其是各類腦膜炎如化膿性腦膜炎（化腦）、病毒性腦膜炎（病腦）、結(jié)核性腦膜炎（結(jié)腦），具有發(fā)病急、進(jìn)展快、病死率和致殘率高等特點(diǎn)，對這類疾病進(jìn)行早期診斷、實(shí)施快速而有效的治療有重要意義。
圖1：神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病感染的解剖圖
對于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的診斷仍需依賴腦脊液檢查結(jié)果，尤其是病原微生物的檢查結(jié)果。不同炎癥反應(yīng)（包括細(xì)菌性、病毒性、肉芽腫性）腦脊液成分特點(diǎn)不同，通常以腦脊液常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測進(jìn)行鑒別診斷，然而因經(jīng)驗(yàn)性抗生素的應(yīng)用，各類腦膜炎患者的臨床癥狀、體征及腦脊液改變越來越不典型，且炎癥指標(biāo)易受到外界因素影響，對鑒別病毒性、化膿性腦膜炎局限性較大，無法判斷感染程度。
血清病原體抗體陽性僅能證明體內(nèi)存在病原微生物感染，唯有腦脊液檢出病原體抗體才表明存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性免疫反應(yīng)。根據(jù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的病原體類型分為細(xì)菌性感染、病毒性感染、真菌性感染、寄生性感染等；從目前的調(diào)研來看，用于腦脊液抗體檢測的試劑在NMPA中暫無注冊產(chǎn)品（見表1），也就是說目前關(guān)于腦脊液抗體檢測試劑在國內(nèi)市場的臨床注冊產(chǎn)品仍處于空白。
雖然國內(nèi)用于腦脊液抗體檢測的試劑仍處于空白，但檢測腦脊液特異性抗體對臨床診斷具有重要意義；目前國內(nèi)各大研究機(jī)構(gòu)、臨床科室及臨床檢驗(yàn)中心已針對中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的腦脊液特異性抗體檢測開展了大量的前瞻性研究（見表２）。
根據(jù)《Global, regional, and national burden ofmeningitis, 1990–2016: a systematic analysis for the Global Burden of DiseaseStudy 2016》的研究，中國的病毒性腦膜炎死亡人數(shù)是全球最高的前十個(gè)國家之一，發(fā)病率為4-5/10萬，與艾滋病的發(fā)病率相仿（艾滋病：4/10萬），而病毒性腦膜炎只是中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的冰山一角；可見中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的腦脊液特異性抗體檢測在中國乃至海外市場仍處于藍(lán)海領(lǐng)域。
小結(jié)：
1、腦脊液抗體檢測在國內(nèi)市場處于空白領(lǐng)域；
2、針對中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的市場臨床需求量大。
腦脊液特異性抗體檢測的臨床意義
腦脊液具有可以調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓，參與腦組織物質(zhì)代謝，保護(hù)腦組織等作用，是一種極其重要的動(dòng)態(tài)代謝活性物質(zhì)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)是一個(gè)獨(dú)立完整的免疫系統(tǒng)，腦脊液為中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供了一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境，血腦屏障（BBB，Blood Brain Barrier）是中樞神經(jīng)組織重要的保護(hù)層，維持腦內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定發(fā)揮著重要作用；當(dāng)細(xì)菌、真菌、病毒和螺旋體等多種病原體引起相應(yīng)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病時(shí)，血腦屏障的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，引起血腦屏障的通透性增加，使大量蛋白質(zhì)成分入腦；而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，不論血腦屏障是正常的還是受損的，均發(fā)現(xiàn)有免疫球蛋白，無法判斷腦脊液中免疫球蛋白的來源。近年來研究證實(shí)一些B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞可以穿越血腦屏障，成了腦脊液中免疫系統(tǒng)的一員；當(dāng)腦脊液受到病原體的感染時(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)也將啟動(dòng)體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生鞘內(nèi)保護(hù)性抗體；因此，腦脊液中的抗體來源有兩部分：
1)????B細(xì)胞產(chǎn)生的（腦源性蛋白）；
2)????血液跨過血腦屏障被動(dòng)擴(kuò)散產(chǎn)生的（血源性蛋白）；
????要區(qū)分該兩種蛋白成分，就必須考慮血腦屏障功能和糾正腦脊液中產(chǎn)生的特異性抗體，從而大大提高診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的準(zhǔn)確性和臨床實(shí)用性；當(dāng)前認(rèn)為抗體指數(shù)（AI，Antibody Index）是反映鞘內(nèi)異常體液免疫反應(yīng)的重要指標(biāo)，鞘內(nèi)免疫合成的定量抗體檢測對于診斷、治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病有著重要意義。
AI=Qspec/QlgG
（AI：Antibody Index; Qspec：the cerebrospinal fluid (CSF)/serum quotients for specificantibodies；QlgG：total IgG）
AI正常參考范圍：0.7-1.3；
AI≥1.5表示中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有局部特異性抗體合成。
AI是定量評(píng)價(jià)鞘內(nèi)IgG合成的一種常用方法，且包含反映血腦屏障功能狀態(tài)的最好指標(biāo)。
在Hansotto Reiber的研究中，除了可以定量評(píng)價(jià)鞘內(nèi)IgG，還可用于分析鞘內(nèi)IgA和IgM的生成情況（見圖2）。
圖2：AI在腦脊液特異性抗體IgA、IgG、IgM的應(yīng)用
AI已在多發(fā)性硬化癥、單純皰疹、水痘-帶狀皰疹、HIV和萊姆病等多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中得到應(yīng)用，且診斷的敏感性和特異性均高于特異性抗體Western Blot、寡克隆區(qū)帶、IEF（等電聚焦電泳法）（見圖3）。
圖3：抗體指數(shù)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病感染的評(píng)估
需要腦脊液特異性抗體檢測的病原體有哪些？
Roberta L. DeBiasi的研究認(rèn)為在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷中腦脊液檢測是極為有效的；根據(jù)國內(nèi)外文獻(xiàn)研究，可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病的病原體如下表（見表３）。
腦脊液特異性抗體檢測試劑的關(guān)鍵原料——抗原在哪里？
”好試劑的基礎(chǔ)是好原料“，生產(chǎn)企業(yè)一定要認(rèn)真篩選符合企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)、產(chǎn)品質(zhì)量要求的優(yōu)質(zhì)上游原材料。?只有這樣，才能生產(chǎn)出好的產(chǎn)品，確保產(chǎn)品的質(zhì)量。歐美國家大量關(guān)于腦脊液抗體檢測的臨床醫(yī)療器械創(chuàng)新網(wǎng)表明，德國維潤賽潤的相關(guān)抗原用于生產(chǎn)腦脊液特異性抗體檢測試劑已獲歐美市場普遍認(rèn)可，符合CE認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)。以下是部分醫(yī)療器械創(chuàng)新網(wǎng)：
案例1：
荷蘭鹿特丹伊拉斯姆斯醫(yī)學(xué)中心持續(xù)研究了2009-2019年間的HSV（單純皰疹病毒）、VZV（水痘-帶狀皰疹病毒）、風(fēng)疹、麻疹、腸道病毒、A型流感、B型流感、CMV（巨細(xì)胞病毒）、TBEV（蜱傳腦炎病毒）、WNV（西尼羅河病毒）等病毒感染的抗體指數(shù)分布，建立抗體指數(shù)的有效值，為鞘內(nèi)特異性抗體合成提供有力證據(jù)的同時(shí)也將發(fā)揮國家及國際參考的作用。
圖4：2009-2019年測定多種特異性鞘內(nèi)抗體指數(shù)
案例2：德國弗萊堡醫(yī)學(xué)中心一項(xiàng)關(guān)于鞘內(nèi)特異性抗體指數(shù)AI區(qū)分中樞神經(jīng)受累的風(fēng)濕病與多發(fā)性硬化癥的研究表明，腦脊液抗體指數(shù)是確診多發(fā)性硬化癥的檢測方法，也是快速診斷及鑒別診斷的必要方法。
圖５：針對麻疹、風(fēng)疹、水痘-帶狀皰疹病毒的多種鞘內(nèi)特異性抗體指數(shù)的評(píng)估
圖6：評(píng)估麻疹、風(fēng)疹、水痘-帶狀皰疹病毒的鞘內(nèi)特異性抗體指數(shù)
總結(jié)：
超越模仿，IVD行業(yè)將會(huì)迎接更美好的未來；創(chuàng)新跨越，基礎(chǔ)和保障的關(guān)鍵是核心原材料。Virion\Serion GmbH(德國維潤賽潤)擁有BSL-3三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（P3實(shí)驗(yàn)室），在病原體診斷領(lǐng)域的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)積累超過四十年，相關(guān)抗原用于生產(chǎn)腦脊液特異性抗體檢測試劑符合CE認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，在國外已廣泛應(yīng)用于開發(fā)商品化試劑，是我國IVD生產(chǎn)廠家研發(fā)和生產(chǎn)腦脊液抗體檢測試劑的可靠保障！
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